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Elisa實驗稀釋問題解析方案

更新時間:2015-07-21   點擊次數(shù):901次

    本月初時,南京中醫(yī)藥大學(xué)的張老師第二次購買了我司進口人Elisa試劑盒產(chǎn)品,上次實驗在上海恒遠生物公司技術(shù)員的指導(dǎo)下順利完成,張老師對我司產(chǎn)品與服務(wù)都非常滿意。而本次實驗中,張老師遇到了一些問題,到何咨詢。

    張老師說:“我在網(wǎng)上看到一些帖子說是通過抗原濃度,抗體的稀釋倍數(shù),設(shè)立梯度來確定效果,可是我想問測的的結(jié)果怎么看哪個效果好呢?看了一篇文獻他是說OD450值為1左右條件作為*條件,很是不解啊,我做的雙抗夾心法。" 

    聽完張老師的問題描述后,何立即將問題轉(zhuǎn)至技術(shù)部。二十分鐘后,技術(shù)員將問題解析方案整理出:這個確實有好幾種因素來確定,雙抗夾心的話,有包被抗體的濃度、緩沖液的選擇、孵育時間等好幾種因素,您要測試*的效果,就要控制變量的方法來確定。

    一般來說,如果您是夾心法的話主要要用棋盤法確定一抗和抗原的濃度,二抗一般不需要怎么摸條件,您選一到兩個說明書上推薦的濃度即可。棋盤法中選OD值在1左右的一抗?jié)舛龋?此時,應(yīng)該有多個1對應(yīng)的濃度)您要選一個在這個濃度下,測抗原的線性拉得zui寬的那一個。如果一抗?jié)舛忍撸胍獪y的抗原基本都可被吸附,這樣就達不到靈敏檢測的目的;如果一抗?jié)舛忍?,OD值比1小太多又會增大誤差。另外,抗體稀釋液一般就是在洗滌液中加入一定濃度的不相關(guān)蛋白。這樣可以減小非特異吸附(吐溫和蛋白均有此作用),直接用PBS的話可能會造成陰性O(shè)D過高

    問題解決后,張老師非常滿意,并表示下學(xué)期有新的實驗課題要做,還會繼續(xù)來買。非常感謝南京中醫(yī)藥大學(xué)張老師對上海恒遠生物公司的鼎力支持與認可!我們會竭誠為每一位客戶提供的產(chǎn)品與服務(wù)。

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